產(chǎn)品名稱:M肉湯(植物源)
貨號:LZ-PYJ3596
英文名稱:Yeast Malt Broth(VEG.)
產(chǎn)品規(guī)格:250g
保存:RT
YM瓊脂是根據(jù)Wickerham配方配制,用于分離和培養(yǎng)酵母菌、霉菌和其它嗜酸菌。抑真菌物質如鈉、的添加是用于抑制霉菌生長,因此可以從混合培養(yǎng)物中計數(shù)酵母菌。Wickerham建議使用酵母麥芽肉湯通過加入一層無菌的石蠟油(約25px厚)在培養(yǎng)基表面作為酵母菌增菌肉湯。如果有培養(yǎng)基中有生長現(xiàn)象,則在YM瓊脂上劃線分離獲得發(fā)酵菌單菌落。如果要獲得發(fā)酵菌及氧化菌,則向YM肉湯加入酸,并搖瓶培養(yǎng)1~2天。這種條件有利于酵母生長而阻止霉菌產(chǎn)生孢子。接著,酵母可以從YM瓊脂平板上分離得到。
蛋白胨和酵母提取
主要包括:
計算—稱量—溶解—調pH—分裝—滅菌——倒平板等。
計算:,根據(jù)配方計算各種營養(yǎng)成分的用量。
稱量:使用電子天平準確稱取所需,遵循由含量低到含量高的稱量原則。
溶解:將稱好的成分放入相應玻璃容器中,加入所需量的水,加熱使其完全溶解。對于液體培養(yǎng)基,建議使用純化水。若配制固體培養(yǎng)基,則需稱取適量的瓊脂放進已稱量好的培養(yǎng)基中,繼續(xù)加熱至瓊脂全部溶解。
調pH值:待培養(yǎng)基稍冷卻后,按配方要求調整pH值。使用10% NaOH溶液(或10% HCl溶液)調整所配培養(yǎng)基的pH。加堿(或酸)溶液時,應邊滴加邊攪拌,直至后調至要求的pH值。
分裝:根據(jù)需要將培養(yǎng)基分裝于不同的三角燒瓶、試管等。分裝的量不宜超過容器的2/3以免滅菌時外溢。分裝量根據(jù)使用目的和要求決定,但定量分裝,便于應用。
滅菌:應按培養(yǎng)基配方中規(guī)定的條件及時進行滅菌。普通培養(yǎng)基采用121℃、15min高壓濕熱滅菌法,以滅菌效果和不損傷培養(yǎng)基的有效成份。
倒平板:滅菌后取出的固體培養(yǎng)基,根據(jù)需要可將試管立即斜放,冷凝后即成斜面培養(yǎng)基。液體培養(yǎng)基冷卻后可直接根據(jù)需要接進菌種。
此外,還包括一些注意事項和操作細節(jié),如使用度1/100的電子天平稱取、避免使用銅或鐵的容器溶化培養(yǎng)基、調整pH時考慮高壓滅菌后的pH變化等。
1、上海準備好干粉培養(yǎng)基、三角瓶、藥勺、無菌平皿、油性筆等。在瓶身上標注好培養(yǎng)基的
相關信息。
2、將三角瓶置于電子天平上,調零。按照需要用量,用藥勺把干粉培養(yǎng)基添加到三角瓶中。
3、培養(yǎng)基稱量之后及時蓋上培養(yǎng)基瓶蓋,擰緊。用量筒量取適量的蒸餾水或者去離子水。
4、先加入小部分水以濕潤干粉,避免粉塵揚起。再加入剩余的水量。充分搖勻。
5、將培養(yǎng)基加熱煮至沸騰三次,應可見溶液澄清透亮,無明顯瓊脂顆粒掛壁,分層等現(xiàn)象。
6、塞上透氣硅膠塞,包上牛皮紙或者報紙,包扎好。放入高壓滅菌鍋中滅菌。(按需設定滅
菌溫度、時間)
7、暫時不使用的培養(yǎng)基,可以放入50℃烘箱或者水浴中保溫。倒平板時,在超凈工作臺或
生物安全柜中準備好無菌平皿、記號筆等。
8、顆粒培養(yǎng)基拆開包裝后,將無菌培養(yǎng)皿倒置,在底部邊緣寫上平板相關信息。
9、將標記好的無菌平皿翻轉過來,當培養(yǎng)基溫度下降到50℃左右時,傾倒培養(yǎng)基。
10、倒完后可輕輕圓周搖晃平板三圈,使平板邊緣整齊。將平板鋪開可加速瓊脂冷卻凝固。
11、使用之前,將平板倒置于無菌實驗室內的烘箱中,55℃、15 分鐘。烘干平板表面水分。
12、將暫時不使用的平板用報紙包成筒狀,用記號筆標清楚平板的種類、配制日期。
13、然后放進2-8℃的冰箱中保存。用時取出放置室溫下平衡,使用前50℃烘箱烘10 分鐘。
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