實驗內(nèi)容:

1. 稱量→溶化→調pH→過濾→分裝→加塞→包扎→滅菌→無菌檢查

2.干熱滅菌:裝入待滅菌物品→升溫→恒溫→降溫→開箱取物

戊糖片球菌3.高壓蒸汽滅菌:加水→裝物品→加蓋→加熱→排冷空氣→加壓→恒壓→降壓回零→排汽→取物→無菌檢查

4.過濾除菌:組裝滅菌→連接→壓濾→無菌檢查→清洗滅菌

保藏方法:

1. 傳代培養(yǎng)保藏法

又有斜面培養(yǎng)、穿刺培養(yǎng)、皰肉培養(yǎng)基培養(yǎng)等(后者作保藏厭氧細菌用),培養(yǎng)后于4-6℃冰箱內(nèi)保存。

2. 液體石蠟覆蓋保藏法

是傳代培養(yǎng)的變相方法,能夠適當延長保藏時間,它是在斜面培養(yǎng)物和穿刺培養(yǎng)物上面覆蓋滅菌的液體石蠟,一方面可防止因培養(yǎng)基水分蒸發(fā)而引起菌種死亡,另一方面可阻止氧氣進入,以減弱代謝作用。

3. 載體保藏法

是將微生物吸附在適當?shù)妮d體,如土壤、沙子、硅膠、濾紙上,而后進行干燥的保藏法,例如沙土保藏法和濾紙保藏法應用相當廣泛。

4. 寄主保藏法

用于目前尚不能在人工培養(yǎng)基上生長的微生物,如病毒、立克次氏體、螺旋體等,它們在生活的動物、昆蟲、雞胚內(nèi)感染并傳代,此法相當于一般微生物的傳代培養(yǎng)保藏法。病毒等微生物亦可用其他方法如液氮保藏法與冷凍干燥保藏法進行保藏。

5. 冷凍保藏法

可分低溫冰箱(-20-30℃,-50-80℃)、干冰酒精快速凍結(約-70℃)和液氮(-196℃)等保藏法。

6. 冷凍干燥保藏法

先使微生物在極低溫度(-70℃左右)下快速冷凍,然后在減壓下利用升華現(xiàn)象除去水分(真空干燥)。有些方法如濾紙保藏法、液氮保藏法和冷凍干燥保藏法等均需使用保護劑來制備細胞懸液,以防止因冷凍或水分不斷升華對細胞的損害。保護性溶質可通過氫和離子鍵對水和細胞所產(chǎn)生的親和力來穩(wěn)定細胞成分的構型。保護劑有牛乳、血清、糖類、甘油、二甲亞砜等。

酵母菌：目前研究發(fā)現(xiàn)酵母菌具有調節(jié)腸道平衡、促進飼料轉化以及提高機體功能等良好的益生特性，多作為飼料添加劑用于畜禽養(yǎng)殖。研究較多的酵母菌有釀酒酵母屬、德爾布有孢圓酵母屬、假絲酵母屬、威克漢姆酵母屬、畢赤酵母屬、布拉氏酵母屬、白球擬酵母屬、薛瓦酵母屬、深紅酵母屬、粟酒裂殖酵母屬、鮑氏酵母屬

益生芽孢桿菌：是一類對機體具有益生特性的丁酸梭菌：又名酪酸梭菌，是從健康人和動物腸道中分離出的一種厭氧的革蘭氏陽性芽孢桿菌。目前研究發(fā)現(xiàn)丁酸梭菌具有維持腸道菌群平衡、增強機體功能、生成營養(yǎng)物質、防治腸炎等良好的益生特性、好氧或兼性厭氧、產(chǎn)芽孢的桿狀細菌，為革蘭氏染色陽性菌

益生菌可合成消化酶，它們與動物體合成的消化酶一起，參與腸道中營養(yǎng)物質的消化 [3] ，刺激動物體分泌消化酶，降低小腸隱窩深度，增加絨毛高度，增加小腸表面積，促進腸道營養(yǎng)物質的吸收

腸道不僅是機體正常的組成部分，參與機體重要的生理活動，同時，腸道中還存在復雜的腸道菌群，它們對宿主的生長、發(fā)育和健康等方面發(fā)揮著重要的功能 [6] 。